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抗體特異性的那些事兒

更新時間:2019-11-22   點擊次數:1173次

    特異性的挑選首要需求考慮四個方面:蛋白特異性、種屬特異性、試驗辦法特異性、符號物的特異性。
 
    1.蛋白特異性: 

    針對需求檢測的蛋白查找抗體,幾個細節要區分,重組表達的蛋白和內源性蛋白的檢測,對抗體的要求是不一樣的,留意查看抗體說明書的檢測說明。如果重組蛋白不是全長表達,則需求留意抗體的免疫原區域是否在重組蛋白區域內。

    2.種屬特異性:

    同種蛋白不同物種,有著或大或小的差異。現在大部分商品化抗體都是以人源蛋白序列為模板重組蛋白或規劃多肽抗原的,根據蛋白的同源性的狀況與其他種屬發生交叉反響。需求參照說明書注明的可反響種屬信息。一些稀有種屬很難找到抗體,能夠經過蛋白的序列比對,挑選同源序列免疫的抗體,不過一般這種狀況生產商不會受理其關于質量的申訴,如果能夠申請到免費的抗體樣品,則利于抗體挑選。
 
    3.試驗辦法特異性:

    現在運用抗體的試驗辦法有許多,不同的運用辦法過程中,因為對蛋白樣品的處理辦法不一樣,蛋白的含量有差異,對抗體的辨認表位和效價要求都是不一樣的。詳細的根據說明書注明的產品應用辦法進行挑選。

    4.符號物的特異性:

    一般基于試驗操作的試驗辦法不會運用帶有符號的一抗,比方 WB、IHC 等,都是經過二抗類的試劑符號達到結果呈現的目的。可是基于儀器剖析的一些試驗,或許就會運用到直接符號的一抗,比方流式試驗。那么需求了解到自己將要運用的儀器能檢測到的熒光范圍,針對不通的參數要求挑選對應的符號物。在免疫熒光雙標試驗中,需求選配不同的熒光符號物。




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