教你如何測濃度！

更新時間：2022-06-17 點擊次數(shù)：3456次

很多新手學生說不太好測濃度，那么今天我把測量方法拿來和大家一起分享分享吧！

【預期用途】

僅供科研使用，本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中蛋白磷酸化酶2A（PP2A）活性。

【檢測原理】

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人蛋白磷酸化酶2A（PP2A）水平。用純化的人蛋白磷酸化酶2A（PP2A）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入蛋白磷酸化酶2A（PP2A），再與HRP標記的蛋白磷酸化酶2A（PP2A）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的蛋白磷酸化酶2A（PP2A）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人蛋白磷酸化酶2A（PP2A）活性濃度。

【產(chǎn)品性能

1、物理性能

試劑盒的各液體組分應(yīng)澄清透明、無沉淀或者絮狀物。微孔板鋁箔袋應(yīng)真空包裝，無破損漏氣(如有漏氣，不影響使用）。

2、劑量反應(yīng)曲線線性

標準品劑量反應(yīng)曲線相關(guān)系數(shù)r值，大于等于0.9900。

3、檢測范圍

1.2U/L -45U/L。

4、靈敏度

檢出劑量不能小于0.3U/L 。

5、精密度

精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV 表示。CV（%） = SD/mean×100

批內(nèi)差：取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測，每份樣本連續(xù)測定20 次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD 值。

批間差：選取3 個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定，每個樣本使用同一試劑盒重復測定10 次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD 值。

批內(nèi)差： CV<5.9%

批間差： CV<8.1%

6、回收率

分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍和平均回收率。

7、線性

分別往5個樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。將5個樣本分別稀釋2倍，4倍，8倍，16倍做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。

8、特異性

本試劑盒識別天然和重組人蛋白磷酸化酶2A（PP2A），經(jīng)檢測與其它相似物質(zhì)無明顯交叉反應(yīng)。由于受到技術(shù)及樣本來源的限制，不可能完成所有相關(guān)或相似物質(zhì)交叉反應(yīng)檢測，因此本試劑盒有可能與未經(jīng)檢測的其它物質(zhì)有交叉反應(yīng)。

9、穩(wěn)定性

經(jīng)測定，試劑盒在有效期內(nèi)務(wù)必按推薦溫度保存，活性降低率小于5%。為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響，實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致，尤其是實驗室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。

【操作步驟】

1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

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