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血清、血漿、尿液、唾液和細胞的收集和處理方法

更新時間:2026-04-23   點擊次數(shù):31次

一、血清的收集與處理

采集方法

血清是通過靜脈采血獲得的,采血后血液在無抗凝劑條件下自然凝固,析出的淡黃色液體即為血清。采血時需使用無菌技術(shù),避免溶血,因為溶血會釋放具有過氧化物酶活性的物質(zhì),導(dǎo)致ELISA等檢測方法出現(xiàn)非特異性顯色反應(yīng),影響結(jié)果準確性。


處理流程

凝固與離心:采血后,血液在室溫下靜置30分鐘至1小時,待完-全凝固。隨后以2500-3000轉(zhuǎn)/分鐘離心5-10分鐘,分離血細胞與血清。

保存條件:血清應(yīng)分裝保存于-20°C或-80°C,避免反復(fù)凍融。短期保存可置于4°C,但不宜超過24小時。保存過程中若出現(xiàn)沉淀,使用前需再次離心。


注意事項

避免37°C長時間放置,以防血清混濁和成分降解。

熱滅活可能導(dǎo)致沉淀增多,若非必要,不建議進行此步驟。


二、血漿的收集與處理

采集方法

血漿通過靜脈采血獲得,采血時需使用抗凝劑(如EDTA、肝素鈉或枸櫞酸鈉)以防止血液凝固。采血后30分鐘內(nèi),需輕柔混合樣本10-20次,確保抗凝劑均勻分布。


處理流程

離心分離:混合后的血液在2-8°C條件下以5000-6000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘,分離血漿與血細胞。

保存條件:血漿應(yīng)分裝保存于-20°C或-80°C,避免反復(fù)凍融。保存過程中若有沉淀形成,使用前需再次離心。


注意事項

避免溶血或高血脂樣本,以防檢測干擾。

使用前需檢查ELISA試劑盒說明書,確認抗凝劑兼容性。


三、尿液的收集與處理

采集方法

尿液樣本可通過自然排尿收集,常用方法包括晨尿、隨機尿或計時尿(如24小時尿)。采集時使用無菌容器,避免陰道分泌物、精液或糞便污染。


處理流程

離心分離:尿液在2-8°C條件下以5000-6000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘,分離上清液。

保存條件:上清液可保存于4°C(1-2天)或-20°C(1個月)。長期保存需分裝,避免反復(fù)凍融。


注意事項

尿液易受細菌污染,需立即冷藏或添加防腐劑(如甲苯)以防細菌繁殖和尿素分解。

計時尿需記錄總尿量和體積,以計算藥物排泄總量。


四、唾液的收集與處理

采集方法

唾液樣本可通過自然分泌或刺激分泌(如咀嚼無糖口香糖)收集。采集前1小時需禁食,并用清水或生理鹽水漱口以減少食物殘渣干擾。


處理流程

離心分離:唾液在2-8°C條件下以5000-6000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘,分離上清液。

保存條件:上清液可保存于4°C(短期)或-20°C(長期)。保存過程中若有沉淀形成,使用前需再次離心。


注意事項

唾液采集無創(chuàng)且方便,適合兒童或頻繁采樣場景。

唾液pH和分泌量受飲食和情緒影響,需標準化采集條件。


五、細胞的收集與處理

采集方法

細胞樣本可通過組織活檢、血液分離或細胞培養(yǎng)獲得。血液樣本需使用抗凝劑(如肝素),組織樣本需在無菌條件下切取。


處理流程

分離與培養(yǎng):血液樣本經(jīng)離心分離血細胞后,可進行細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)上清液需在2-8°C條件下以5000-6000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘,分離上清液。

保存條件:細胞可保存于液氮(長期)或-80°C(短期)。保存過程中需避免反復(fù)凍融,以防細胞損傷。


注意事項

細胞樣本易受污染,需嚴格無菌操作。

培養(yǎng)上清液需及時處理,以防分泌性成分降解。


六、總結(jié)與建議

標準化操作:所有樣本采集需遵循標準化流程,確保數(shù)據(jù)可比性。

質(zhì)量控制:定期驗證樣本處理方法的準確性,如通過質(zhì)控樣本檢測。

倫理與安全:涉及人體樣本時,需遵守倫理審查和知情同意原則。

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