客戶咨詢ELISA常見(jiàn)問(wèn)題

1. 產(chǎn)品有哪幾種規(guī)格？可檢測(cè)多少個(gè)樣本？
產(chǎn)品分為48T和96T兩種規(guī)格。
每次實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線一般設(shè)5個(gè)不同濃度，加上空白孔，標(biāo)準(zhǔn)曲線一共需要11個(gè)孔。因此，一個(gè)48T試劑盒zui多可以測(cè)定37個(gè)樣本（不做重復(fù)且一次用完），一個(gè)96T試劑盒zui多可以測(cè)定85個(gè)樣本（不做重復(fù)且一次用完）。可以根據(jù)實(shí)際樣本數(shù)量和實(shí)驗(yàn)計(jì)劃選擇合適的產(chǎn)品規(guī)格。

2.48T和96T的試劑盒有哪些不同？
48T和96T的試劑盒，每個(gè)孔的反應(yīng)體系都是*一樣的。不同的是試劑盒中各組分的規(guī)格，詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)。

3. 產(chǎn)品的穩(wěn)定性如何？
產(chǎn)品在研發(fā)前期已通過(guò)嚴(yán)格的穩(wěn)定測(cè)試，發(fā)貨前亦須通過(guò)檢測(cè)并提供質(zhì)檢報(bào)告，在市場(chǎng)上深受廣大客戶的贊許！

4.貴公司有沒(méi)有酶活性檢測(cè)的試劑盒？
酶活力的測(cè)定實(shí)際上就是測(cè)定酶促反應(yīng)的速率。酶活力的大小即酶含量的多少，可以用每克酶制劑或每毫升酶制劑含有多少酶單位來(lái)表示，單位是U/g或U/ml。酶活力的測(cè)定方法：⑴測(cè)定完成一定量反應(yīng)所需的時(shí)間，⑵測(cè)定單位時(shí)間內(nèi)酶催化化學(xué)反應(yīng)量。主要通過(guò)產(chǎn)物的增加量或底物的減少量來(lái)測(cè)定。常用的方法有：⑴分光光度法，⑵熒光法，⑶同位素測(cè)定法，⑷電化學(xué)法。
ELISA的方法一般是對(duì)可溶性抗原或抗體進(jìn)行定性和定量的檢測(cè)，所以酶活性是不能用ELISA來(lái)檢測(cè)的。

5.一次ELISA實(shí)驗(yàn)需要多長(zhǎng)時(shí)間？
雙抗體夾心ELISA法一次實(shí)驗(yàn)需要4-4.5小時(shí)，競(jìng)爭(zhēng)ELISA法一次實(shí)驗(yàn)需要2-2.5小時(shí)。

6.血清樣本如何處理？
全血標(biāo)本于室溫放置2小時(shí)或4℃guoye后于1000×g離心20分鐘。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

7. 血漿樣本如何處理？
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，于1000×g離心15分鐘，仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

8. 尿液樣本如何處理？
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

9.細(xì)胞上清液樣本如何處理？
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（1000×g）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心10分鐘左右（5000×g）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

10.   組織樣本如何處理？
用預(yù)冷的PBS (0.01M,pH=7.4)沖洗組織，以去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果），稱(chēng)重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣本對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于5000×g 離心5~10分鐘，取上清檢測(cè)。

11.為什么有的試劑盒是采用競(jìng)爭(zhēng)ELISA法？
小分子抗原或半抗原因?yàn)槿狈勺鲓A心法的兩個(gè)以上的位點(diǎn)，因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測(cè)定，可以采用競(jìng)爭(zhēng)法。其原理是標(biāo)本中的抗原和固相載體上的抗原競(jìng)爭(zhēng)生物素化抗體上的結(jié)合位點(diǎn)，標(biāo)本中抗原量含量愈多，結(jié)合在固相上的生物素化抗體愈少，zui后的顯色也愈淺，即顯色深淺與樣本中的抗原濃度成反比。小分子激素、藥物等ELISA測(cè)定多用此法。

12.用什么軟件處理ELISA檢測(cè)的數(shù)據(jù)比較好？
ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合可以應(yīng)用Curve Expert軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。它使用非常方便，可以漂亮的曲線應(yīng)用到論文之中。軟件可以在下載中心進(jìn)行下載。

13. 試劑盒做的結(jié)果不理想怎么辦？
實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想請(qǐng)及時(shí)與客服或，我們可以幫您一起分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。如果僅憑實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)無(wú)法判斷，您可以將試劑盒發(fā)回給我們進(jìn)行售后檢測(cè)。如果是試劑盒本身的質(zhì)量問(wèn)題，可以為您退換貨；如果是實(shí)驗(yàn)操作的問(wèn)題，技術(shù)人員可以給您一些改進(jìn)的建議。